巴氏染色液固定注意事項固定液的過(guò)濾：為了防止細胞污染，凡是使用過(guò)的固定液，必須過(guò)濾后才能再使用。使用過(guò)長(cháng)的固定液，必須用酒精相對密度計測定，酒精濃度低于90%時(shí)應該及時(shí)更換新液。濕固定的重要性：標本再新鮮時(shí)及時(shí)固定時(shí)保證染色效果的重要因素。如蘇木素對細胞核的染色，巴氏染色中胞漿的特殊著(zhù)色作用，均可因標本干燥后固定而大受影響。制片標本的郵寄：標本再固定15min后取出，立即加甘油數滴于制片上，裝入密封的小盒中。實(shí)驗室在收到標本后，先浸入95%酒精中，使甘油溶去，再進(jìn)行染色。液基細胞制片設備

巴氏染色液浸染時(shí)間一般在3-5min，但是必須隨氣溫和染料情況而酌情改變。夏季或放置較久的蘇木素染液容易著(zhù)色，時(shí)間要縮短；冬季或新配制的蘇木素染液和應用已久較稀釋的蘇木素液不易著(zhù)色，時(shí)間要延長(cháng)。在使用蘇木素染色時(shí)，一般有2種方法：

1）過(guò)染法：首先有意識地進(jìn)行深染，然后通過(guò)鹽酸酸化過(guò)程使核染色趨于合適。這種方法能夠在酸化過(guò)程中把胞漿內黏附多余的蘇木素染料去掉，使胞漿染色更為鮮艷、清晰、多用于黏液多的標本。

巴氏染色液在核染色過(guò)程中，嚴格掌握染色時(shí)間，使核染色適宜而不用鹽酸酸化，但是胞漿中少量的蘇木素會(huì )影響EA染色的質(zhì)量。主要用于黏液少的標本，避免在酸化和自來(lái)水沖洗的過(guò)程中使細胞成片地脫落。在使用蘇木素染色時(shí)，一定要每日進(jìn)行過(guò)濾，否則蘇木素結晶會(huì )影響染色的質(zhì)量。一般蘇木素染液可以使用較長(cháng)時(shí)間，所以每日增加少量新鮮染液即可。

巴氏染色液可以使用飽和碳酸鋰或3%氨水堿化，目的使蘇木素及早顯色，時(shí)間約數秒。更重要的是流水沖洗，可使藍色顯的更鮮艷。堿性溶液亦需要充分漂清才不會(huì )妨礙下一步的胞漿著(zhù)色及標本制成后的顏色保存。分化和堿化溶液至少每天更換新液。