制作一張良好的冰凍切片，保證切片質(zhì)量的同時(shí)，又要提高手術(shù)中快速病理診斷的準確率，那么這跟對冰凍切片機的認識和選擇有很大關(guān)系。下面就常用的冰凍切片機的分類(lèi)、原理做簡(jiǎn)單的整理和歸納。
冰凍切片機主要分為兩大類(lèi)，即冰凍切片機(Freezing Mierotome)和低溫恒冷冰凍切片機(Cryostat)。
1.冰凍切片機
一般是由輪轉式切片機或推拉式切片機加上致冷裝置而成的。常用的致冷裝置有二氧化碳冷凍裝置和半導體冷凍裝置。

(1)二氧化碳致冷器的基本原理是采用二氧化碳氣體凍結組織。切片機往往與一個(gè)二氧化碳鋼瓶相連，使氣體能通向切片機的載物臺，有的還可通向切片刀。切片時(shí)打開(kāi)二氧化碳氣門(mén)，氣體即通過(guò)管道噴出。由于大量吸熱，載物臺(又稱(chēng)冷凝臺)及其上的組織迅速冷卻，切片刀的溫度也相應降低，即可切片。組織和切片刀的溫度可通過(guò)適當控制開(kāi)關(guān)，改變二氧化碳氣流的大小進(jìn)行調節。

(2)半導體致冷器的基本原理是利用Peltier效應。Peltier觀(guān)察到當直流電通過(guò)兩種不同的金屬時(shí)，即在這兩種金屬交界的一個(gè)面產(chǎn)生熱量，另一面喪失熱量。根據這一原理做成熱電微型元件，即將多個(gè)溫差電偶按一定的順序排列起來(lái)，形成一個(gè)較大的界面，當直流電通過(guò)時(shí)，電偶的一端發(fā)熱，另一端致冷。將這種裝置用于冰凍切片，可將溫度比較精確地控制到-30℃士0.1℃，并可長(cháng)久保持恒定。電偶吸熱端和放熱端之溫差在一定范圍內與電流的大小成正比，電流越大，溫差就越大。但電流超過(guò)一定范圍后，溫差反而降低。最大溫差時(shí)通過(guò)電偶的電流即為“最佳電流”，如果有循環(huán)水等散熱方式將放熱端予以冷卻，則吸熱端的溫度將隨之下降，半導體冰凍切片即是利用電偶的吸熱端冷卻組織，使之硬化而制作切片。

2.低溫恒冷冰凍切片機
50年代中期，開(kāi)始有人將低溫恒冷冰凍切片機用于病理診斷，使冰凍切片的質(zhì)量和速度都有了很大的提高。

低溫恒冷冰凍切片機實(shí)際上就是將經(jīng)過(guò)改良的切片機置于一個(gè)冷凍室內，與電冰箱致冷原理相同，利用壓縮機通過(guò)氟利昂循環(huán)致冷。切片機的操作大部分在冷凍室外進(jìn)行。目前常用的切片機為輪轉式的。低溫恒冷切片機又分為全封閉式和頂部開(kāi)放式。頂部開(kāi)放式的切片機上部有一大的滑動(dòng)玻璃窗，通過(guò)此窗放入組織，調整切片機，進(jìn)行切片。本機可以自由選擇溫度、切片厚度，制片迅速，可以連續切片，染片質(zhì)量可與常規石蠟切片媲美，而且組織內的生物活性物質(zhì)保存良好，適用于組織化學(xué)、免疫熒光和免疫組織化學(xué)等染色。制片溫度選擇可按組織類(lèi)型及切片厚度而定，大多數組織以-15℃～-20℃為宜，脂肪組織所需溫度更低，可加用干冰冷凍。

使用低溫恒冷切片機進(jìn)行切片，要獲得好的薄片，也需要一定的條件。除了組織必須新鮮而且迅速冷凍外，低溫恒冷切片機本身必須處于適當的狀態(tài)，包括：①冷凍室，切片刀及組織固定臺必須處于最佳切片溫度。②切片機操作必須正確。③防卷板調節必須正確。       【組織固定液】組織固定溶液小知識