固定的目的細胞制片的迅速固定是制片過(guò)程中關(guān)鍵的一步，否則會(huì )影響細胞學(xué)診斷的準確性。對于不同的標本需要不同的固定方法。最為常用的固定方法是95%酒精作為固定液的濕固定法。酒精作為一種脫水劑能夠防止細胞內的酶捋蛋白質(zhì)分解而自容，并凝固細胞內的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、脂肪和糖類(lèi)等，使其保持與組織生活相仿的成分，從而使細胞各部分，尤其核染色質(zhì)易于著(zhù)色。對于巴氏染色來(lái)說(shuō)，酒精固定最為重要的。如果酒精濃度不足引起的固定不佳，可造成細胞的人為變化，并可導致假陽(yáng)性或假陰性的診斷。

1、 蘇木素液浸染時(shí)間一般在3-5min，但是必須隨氣溫和染料情況而酌情改變。夏季或放置較久的蘇木素染液容易著(zhù)色，時(shí)間要縮短；冬季或新配制的蘇木素染液和應用已久較稀釋的蘇木素液不易著(zhù)色，時(shí)間要延長(cháng)。在使用蘇木素染色時(shí)，一般有2種方法：

1）過(guò)染法：首先有意識地進(jìn)行深染，然后通過(guò)鹽酸酸化過(guò)程使核染色趨于合適。這種方法能夠在酸化過(guò)程中把胞漿內黏附多余的蘇木素染料去掉，使胞漿染色更為鮮艷、清晰、多用于黏液多的標本。

2）淡染法：在核染色過(guò)程中，嚴格掌握染色時(shí)間，使核染色適宜而不用鹽酸酸化，但是胞漿中少量的蘇木素會(huì )影響EA染色的質(zhì)量。主要用于黏液少的標本，避免在酸化和自 來(lái)水沖洗的過(guò)程中使細胞成片地脫落。在使用蘇木素染色時(shí)，一定要每日進(jìn)行過(guò)濾，否則蘇木素結晶會(huì )影響染色的質(zhì)量。一般蘇木素染液可以使用較長(cháng)時(shí)間，所以每日增加少量新鮮染液即可。

2、堿化堿化亦稱(chēng)返藍過(guò)程，可以使用飽和碳酸鋰或3%氨水堿化，目的使蘇木素及早顯色，時(shí)間約數秒。更重要的是流水沖洗，可使藍色顯的更鮮艷。堿性溶液亦需要充分漂清才不會(huì )妨礙下一步的胞漿著(zhù)色及標本制成后的顏色保存。分化和堿化溶液至少每天更換新液。   【標本冷藏柜】組織固定溶液安全性