淺析巴氏染色液的正規染色法

據悉,巴氏染色是細胞學(xué)的唯一正規染色法。巴氏染色并不很普及,建議采用統一的巴氏染色液,有利于交流和統一標準,同時(shí)也建議廠(chǎng)商開(kāi)發(fā)成品化生產(chǎn)巴氏染色液,以適應醫療單位的需求。人體的細胞是透明的,本來(lái)沒(méi)有顏色,尤其是胞質(zhì)非常透明。在核被染上蘇木精色以后,可以透過(guò)胞質(zhì)清晰的顯示核的結構,而胞質(zhì)也可著(zhù)上一層淡淡的鮮艷的顏色,并不影響對核的觀(guān)察。細胞著(zhù)色的原理,至今尚無(wú)很好的解釋?zhuān)皇峭茢嗯c理化或觸媒作用有關(guān)。生物化學(xué)可能是因素之一。含堿性根(K,Na等)的染色劑易于使胞質(zhì)著(zhù)色,如伊紅、EA36等,被稱(chēng)為酸性色;含酸性根(O-,S-)的染色劑易于使細胞核著(zhù)色,如蘇木精、瑞氏染色劑等稱(chēng)為堿性色。細胞周?chē)h(huán)境的酸堿度也可能與著(zhù)色有關(guān):偏堿,細胞內帶正電離子(NH3)就增加,可使酸性著(zhù)色較重;在偏堿環(huán)境時(shí),細胞內帶負電荷的離子(COO=)增加,可使堿性著(zhù)色明顯。
巴氏染色是診斷細胞學(xué)的很好的染色方法,具有迄今為止任何其他染色方法無(wú)法相比的優(yōu)點(diǎn):細胞核細微結構清晰,能辨認染色質(zhì)的模式;細胞質(zhì)透明多彩;顯示細胞分化程度,因此,巴氏染色是細胞學(xué)中最經(jīng)典、最重要的基本染色方法。
巴氏染色的主要優(yōu)點(diǎn):
清楚顯示細胞核(Definition of nuclear detail)的結構及其染色質(zhì)模式;
胞漿透明(Cytoplasmic transparency)與核的染色形成反差,對比度好;
顯示細胞的分化(Cell differentiation),呈現細胞從強嗜堿性到強嗜酸性的各個(gè)階段的多種色譜的著(zhù)色,易于辨認細胞的分化程度。
除上述特點(diǎn)外,巴氏染色還具有:
著(zhù)色度牢靠,不易掉色,有利于細胞涂片的長(cháng)期保存;
由于CCD攝像頭對紅色過(guò)度敏感,HE片在拍照時(shí)紅色過(guò)度顯示,影響對細胞的觀(guān)察,也不利于圖像的發(fā)表,而巴氏染色下的胞漿綠色則無(wú)此表現;
縮短看片時(shí)間,巴氏染色下的細胞質(zhì)著(zhù)色有著(zhù)高度角化細胞的特殊顏色:橘黃色、橘紅色和深伊紅色,大多數低級別病變的問(wèn)題細胞有著(zhù)這些顏色,在低倍鏡觀(guān)察時(shí)能較容易發(fā)現這些問(wèn)題細胞,故能縮短看片時(shí)間。
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