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【細胞保存液】如何提高細胞凍存成功率?

發(fā)表日期:2018-08-23 18:35:26   來(lái)源:本站   被閱讀[]次
對于很多科研汪來(lái)說(shuō),細胞是最脆弱又重要的寶貝之一,承擔著(zhù)重要的實(shí)驗數據希望。尤其是在凍存復蘇的時(shí)候,經(jīng)常會(huì )因為一些小細節導致問(wèn)題。比如:

沒(méi)有控制好細胞的生長(cháng)密度

細胞的密度對細胞的生存質(zhì)量有著(zhù)重要的影響,畢竟它們是一群又不能擠著(zhù)了也不能孤獨的嬌貴寶寶。密度過(guò)高會(huì )讓細胞沒(méi)有足夠的生存空間,密度過(guò)低會(huì )讓細胞無(wú)法互相連接健康生長(cháng)。建議大家在細胞接種前,一定要調整好適合細胞生長(cháng)的濃度,提高細胞的存活率。
溫度控制不達標

慢凍快融是細胞凍存復蘇的核心關(guān)鍵詞之一。常規的凍存操作中,都會(huì )要求嚴格的梯度降溫,常見(jiàn)的是 -4℃ → -20℃ 至 - 40℃→ -80℃ → 液氮,一定要避免溫度原因導致細胞自取滅亡;除非使用了成分經(jīng)過(guò)優(yōu)化、經(jīng)過(guò)嚴格測試的凍存液,才能免去程序降溫這個(gè)繁瑣的步驟。保存的時(shí)候也要保證整個(gè)細胞都是處于液氮的液面下方,避免溫度對細胞存活的影響。

無(wú)菌!無(wú)菌!無(wú)菌!

要折騰嬌貴的細胞寶寶,必須要在無(wú)菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺,所有的儀器用品提前滅菌,培養箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對細胞的影響經(jīng)常是開(kāi)始的時(shí)候沒(méi)發(fā)現,發(fā)現的時(shí)候已經(jīng)結束了,所以千萬(wàn)要小心。

除了操作中的各種小細節,還有一個(gè)實(shí)驗雷區,就是配制細胞凍存液。常見(jiàn)的凍存液配制要遵循培養基 + 血清 + DMSO 的成分要求,根據細胞實(shí)際判斷成分配比,還建議使用程控儀,注意配制溫度,一個(gè)不小心就又會(huì )影響細胞的存活效果。【取材臺的特點(diǎn)】取材臺有哪些特點(diǎn)?
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