【細胞保存液】如何提高細胞凍存成功率?
發(fā)表日期:2018-08-23 18:35:26 來(lái)源:本站 被閱讀[
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對于很多科研汪來(lái)說(shuō),細胞是最脆弱又重要的寶貝之一,承擔著(zhù)重要的實(shí)驗數據希望。尤其是在凍存復蘇的時(shí)候,經(jīng)常會(huì )因為一些小細節導致問(wèn)題。比如:
溫度控制不達標
沒(méi)有控制好細胞的生長(cháng)密度
溫度控制不達標
慢凍快融是細胞凍存復蘇的核心關(guān)鍵詞之一。常規的凍存操作中,都會(huì )要求嚴格的梯度降溫,常見(jiàn)的是 -4℃ → -20℃ 至 - 40℃→ -80℃ → 液氮,一定要避免溫度原因導致細胞自取滅亡;除非使用了成分經(jīng)過(guò)優(yōu)化、經(jīng)過(guò)嚴格測試的凍存液,才能免去程序降溫這個(gè)繁瑣的步驟。保存的時(shí)候也要保證整個(gè)細胞都是處于液氮的液面下方,避免溫度對細胞存活的影響。
要折騰嬌貴的細胞寶寶,必須要在無(wú)菌超凈環(huán)境下才行。超凈工作臺,所有的儀器用品提前滅菌,培養箱什么的定期用酒精擦干凈。微生物污染對細胞的影響經(jīng)常是開(kāi)始的時(shí)候沒(méi)發(fā)現,發(fā)現的時(shí)候已經(jīng)結束了,所以千萬(wàn)要小心。
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