【特殊染色液】提高特殊染色的技術(shù)水平

特殊染色和組織化學(xué)染色是病理學(xué)研究的技術(shù)之一,也是臨床病理診斷中常用的相關(guān)診斷技術(shù)。雖然隨著(zhù)免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展,逐步代替了許多特殊染色和組織化學(xué)技術(shù),但是由于特殊染色具有簡(jiǎn)單、快速和成本低的特點(diǎn)而一直被應用,而且許多特殊染色是免疫組織化學(xué)技術(shù)不能替代的。
1.1特殊染色的概念
為了顯示特定的組織結構或組織細胞特殊成分,用特定的染料和方法對組織切片進(jìn)行染色,稱(chēng)為特殊染色,通常指除HE染色外的所有染色方法。特殊染色是普通染色的必要補充,也是染色技術(shù)中不可缺少的部分,在病理診斷中具有十分重要的輔助作用。
1.2特殊染色的意義
特殊染色是普通染色的必要補充,是染色技術(shù)不可缺少的部分。選用恰當的特殊染色方法,顯示或進(jìn)一步確定病變性質(zhì)、異常物質(zhì)以及病原體,對于疾病的診斷和鑒別診斷具有十分重要的作用。在實(shí)際工作中,一般是先做HE染色,通過(guò)對切片認真細致地觀(guān)察,仍不能做出正確的診斷,或鑒別診斷有困難時(shí),再進(jìn)行特殊染色。通常將特殊染色用于腫瘤的診斷和鑒別診斷,如應用網(wǎng)狀纖維染色可以區別癌與肉瘤。雖然特殊染色具有十分重要的臨床價(jià)值,但它不能取代普通染色,而只能作為普通染色的輔助診斷手段。
特殊染色方法的種類(lèi)很對,一般根據所染對象的不同,分為結締組織染色、肌組織染色、神經(jīng)組織染色、脂質(zhì)染色、糖類(lèi)染色、色素類(lèi)染色、病理內源性沉著(zhù)物染色、病原微生物染色、內分泌細胞染色等。
2具體實(shí)踐
1.1特殊染色的一般原則
1.1.1制片室布局合理
制片室的合理設置和染色的其他準備工作,都是保證組織切片染色質(zhì)量的必要條件。制片室常規設置應科學(xué),室內布置應合理,便于操作,染片臺(架)和試劑柜、各種器皿和染色所需的其他物品必須齊全。
1.1.2嚴格遵循操作常規
大多數的組織切片需經(jīng)過(guò)固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、脫蠟等步驟,在進(jìn)行染色;部分直接經(jīng)冷凍切片染色。這些步驟是否嚴格按照要求進(jìn)行,將直接影響染色的效果。一張固定、脫水、浸蠟等步驟有缺陷的切片,不可能達到顏色鮮艷、組織透明、層次清晰的效果。
1.1.3靈活應用染色技術(shù)
染色過(guò)程中,既要遵循染色操作規程,又要靈活應用特染技術(shù)。當染色效果不佳時(shí),應認真進(jìn)行分析,及時(shí)找出原因,根據實(shí)際情況,恰當調整染色劑的濃度、染液的pH、染色時(shí)間和環(huán)境溫度等。在每一個(gè)必要的環(huán)節上,要堅持用鏡檢來(lái)監控染色程度,在染色完成后,還必須在顯微鏡下檢查切片的染色是否達到要求。
1.2.1固定液和切片類(lèi)型的選擇
1.2.1.1固定恰當 應根據染色方法確定固定液。不同的染色方法,使用的固定液不盡相同,一般選用4%中性甲醛固定液,一些特染方法需要選用特殊的固定液。含汞固定液固定的組織,染色前需經(jīng)脫汞處理。
①脫汞鹽結晶 用含有升汞的固定液(如Zenker氏液或Helly氏液)固定的組織,容易產(chǎn)生棕黃色晶體狀汞鹽沉淀物,染色前必須除去汞鹽結晶,才能進(jìn)行染色。
②脫甲醛色素 使用劣質(zhì)甲醛固定或在高溫下用甲醛固定較久,組織內容易產(chǎn)生黑色或棕色的色素(稱(chēng)為甲醛色素),這一現象以肝、脾、肺等臟器尤甚。
③脫苦味酸著(zhù)色 用苦味酸或含苦味酸的Bouin氏液或Gendre氏液固定的組織,被苦味酸著(zhù)色而顯黃色。
④脫黑色素 黑色素是一種正常的色素多見(jiàn)于眼、皮膚的黑色素細胞,在機體的疾病中易產(chǎn)生異常的黑色素,經(jīng)過(guò)染色能夠清楚地被顯示出來(lái)。 【巴氏染色液】巴氏染色液的使用注意事項
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